Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 30.11.2007 N 80 "О надзоре за оборотом пищевых продуктов, содержащих ГМО" (вместе с "МУ 2.3.2.2306-07. 23.2. Пищевые продукты и пищевые добавки. Медико-биологическая оценка безопасности...

Таблица 2. Состав солевой смеси

Таблица 2

Состав солевой смеси

┌───┬──────────────────────────┬────────────────────────────┬─────────────┐

│ N │ Название соли │ Химическая формула │Количество, г│

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 1 │ Хлористый натрий │ NaCl │ 139,3 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 2 │ Калий фосфорнокислый │ KH2PO4 │ 388,8 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 3 │ Магний сернокислый │ MgSO4 │ 57,4 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 4 │ Кальций углекислый │ CaCO3 │ 380,4 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 5 │ Железо сернокислое │ FeSO4 x 7H2O │ 26,4 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 6 │ Калий йодистый │ KI │ 0,77 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 7 │ Марганец сернокислый │ MnSO4 x 7H2O │ 4,55 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 8 │ Цинк сернокислый │ ZnSO4 x 7H2O │ 0,53 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ 9 │ Медь сернокислая │ CuSO4 x 5H2O │ 0,48 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│10 │ Кобальт хлористый │ CoCl2 x 6H2O │ 0,024 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│11 │ Натрий фтористый │ NaF │ 0,50 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│12 │ Алюмокалиевые квасцы │ K2SO4Al2(SO4)3 x 24H2O │ 0,11 │

├───┼──────────────────────────┼────────────────────────────┼─────────────┤

│ │ ИТОГО │ │ 1000 │

└───┴──────────────────────────┴────────────────────────────┴─────────────┘

6.3.3. Исследуемые показатели:

6.3.3.1. Интегральные показатели

┌─────────────────────────────────────────────┬───────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │Периодичность сбора данных │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│Общее состояние животных (внешний вид, │ каждые 2 дня │

│двигательная активность, состояние шерстного │ │

│покрова) │ │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│Поедаемость корма │ ежедневно │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│Масса тела │ каждые 7 дней │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│Масса внутренних органов (головной мозг, │ На 30-й и 180-й дни │

│сердце, селезенка, легкие, тимус, гипофиз, │ эксперимента │

│печень, почки, надпочечники, семенники) │ │

└─────────────────────────────────────────────┴───────────────────────────┘

6.3.3.2. Гематологические показатели

┌─────────────────────────────────────────────┬───────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │Периодичность сбора данных │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│- концентрация гемоглобина; │ На 30-й и 180-й дни │

│- гематокрит; │ эксперимента │

│- общее количество эритроцитов; │ │

│- средний объем эритроцита (СОЭ); │ │

│- среднее содержание гемоглобина в эритроците│ │

│(ССЭ); │ │

│- средняя концентрация гемоглобина в │ │

│эритроците (СКЭ); │ │

│- общее количество тромбоцитов; │ │

│- общее количество лейкоцитов; │ │

│- дифференцированный подсчет лейкоцитов │ │

│(нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты,│ │

│базофилы) │ │

└─────────────────────────────────────────────┴───────────────────────────┘

6.3.3.3. Биохимические показатели

6.3.3.3.1. Общий биохимический анализ крови

Материал для исследований: сыворотка крови

┌─────────────────────────────────────────────┬───────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │Периодичность сбора данных │

├─────────────────────────────────────────────┼───────────────────────────┤

│- аланинаминотрансфераза (АЛТ); │ На 30-й и 180-й дни │

│- аспартатаминотрансфераза (ACT); │ эксперимента │

│- желчные кислоты; │ │

│- фосфатаза щелочная; │ │

│- билирубин общий; │ │

│- билирубин прямой; │ │

│- белок общий; │ │

│- альбумин; │ │

│- глобулин; │ │

│- креатинин; │ │

│- глюкоза; │ │

│- альфа-амилаза; │ │

│- липаза; │ │

│- лактатдегидрогеназа; │ │

│- общие липиды; │ │

│- триглицериды; │ │

│- холестерин; │ │

│- холинэстераза; │ │

│- мочевина; │ │

│- хлориды; │ │

│- натрий; │ │

│- фосфор; │ │

│- калий │ │

└─────────────────────────────────────────────┴───────────────────────────┘

6.3.3.3.2. Общий анализ мочи. Материал для исследований: моча

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │ Периодичность сбора данных │

├────────────────────────────────────────────┼────────────────────────────┤

│- суточный диурез; │ На 30-й и 180-й дни │

│- цвет и прозрачность; │ эксперимента │

│- относительная плотность; │ │

│- pH; │ │

│- белок; │ │

│- глюкоза; │ │

│- креатинин │ │

└────────────────────────────────────────────┴────────────────────────────┘

6.3.3.3.3. Системные биомаркеры

6.3.3.3.3.1. Система антиоксидантной защиты

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │ Периодичность сбора данных │

├────────────────────────────────────────────┼────────────────────────────┤

│Активность ферментов антиоксидантной защиты.│ На 30-й и 180-й дни │

│Материал для исследований: эритроциты │ эксперимента │

│ - глутатионредуктаза; │ │

│ - глутатионпероксидаза; │ │

│ - супероксиддисмутаза; │ │

│ - каталаза; │ │

├────────────────────────────────────────────┤ │

│Содержание продуктов перекисного окисления │ │

│липидов. Материал для исследований: кровь, │ │

│печень │ │

│ - малоновый диальдегид │ │

└────────────────────────────────────────────┴────────────────────────────┘

6.3.3.3.3.2. Система ферментов метаболизма ксенобиотиков

Материал для исследований: печень

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │ Периодичность сбора данных │

├────────────────────────────────────────────┼────────────────────────────┤

│Активность ферментов 1-й и 2-й фазы │ На 30-й и 180-й дни │

│метаболизма ксенобиотиков │ эксперимента │

│ - общее содержание цитохрома Р-450; │ │

│ - 7-этоксирезоруфин-О-деэтилаза; │ │

│ - 7-пентоксирезоруфнн-О-деэтилаза; │ │

│ - UDP-глюкуронозилтрансфераза; │ │

│ - глутатионтрансфераза │ │

└────────────────────────────────────────────┴────────────────────────────┘

6.3.3.3.3.3. Система регуляции апоптоза

1) стабильность мембран лизосом

Материал для исследований: печень

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│ Изучаемые показатели │ Периодичность сбора данных │

├────────────────────────────────────────────┼────────────────────────────┤

│Общая и неседиментируемая активность │ На 30-й и 180-й дни │

│ферментов лизосом │ эксперимента │

│ - бета-галактозидаза; │ │

│ - бета-глюкуронидаза; │ │

│ - арилсульфатазы A и B │ │

└────────────────────────────────────────────┴────────────────────────────┘

2) другие методы

6.3.3.4. Морфологические исследования

┌─────────────────────────────┬───────────────────────────────────────────┐

│ Исследуемые органы │ Методы исследований │

├─────────────────────────────┼───────────────────────────────────────────┤

│- кожа; │На 30-й и 180-й дни эксперимента (плановый │

│- головной мозг; │ забор) │

│- сердце; │ │

│- аорта; │1. Макроскопические исследования │

│- селезенка; │2. Микроскопические исследования: │

│- легкие; │ а) обзорные гистологические исследования │

│ │3. Морфометрический анализ │

│ ├───────────────────────────────────────────┤

│- лимфатические узлы; │ Вскрытие погибших в течение эксперимента │

│- тимус; │ животных (внеплановый забор) │

│- щитовидная железа; │ │

│- гипофиз; │1. Макроскопические исследования │

│- ЖКТ: желудок, тонкая и │2. Микроскопические исследования (перечень │

│ толстая кишки; │исследуемых органов может быть сокращен до │

│- печень; │минимально необходимого для установления │

│- поджелудочная железа; │причины смерти): │

│- почки; │ а) обзорные гистологические исследования │

│- семенники ├───────────────────────────────────────────┤

│ │ Дополнительные исследования │

│ │ │

│ │1. Микроскопические исследования: │

│ │ а) гистохимические исследования; │

│ │ б) иммуногистохимические исследования │

│ │клеточных популяций и их производных. │

│ │2. Электронно-микроскопические │

│ │исследования │

└─────────────────────────────┴───────────────────────────────────────────┘

6.4. Иммунологические исследования ГМО проводятся в эксперименте на мышах линий СВА и С57В1/6 и включают изучение его иммуномодулирующих и сенсибилизирующих свойств по четырем тестам:

1) действие на гуморальное звено иммунитета - в тесте определения уровня гемагглютининов к эритроцитам барана;

2) действие на клеточное звено иммунитета - в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) к эритроцитам барана;

3) действие как сенсибилизирующего агента - в тесте чувствительности к гистамину;

4) действие на естественную резистентность мышей к Salmonella typhimurium (сальмонеллы мышиного тифа).

В табл. 3 представлены сравнительные характеристики мышей линий СВА и С57В1/6.

Таблица 1. Состав базового полусинтетического казеинового рациона Таблица 3. Характеристики мышей линий СВА и С57В1/6