Метод смыва тампоном (свабом)

68. Сущность метода заключается в смыве тампоном (свабом), увлажненным стерильной средой, участка контролируемой поверхности (далее по тексту - площадь смыва).

69. Площадь смыва может варьироваться от 25 до 100 см². Площадь смыва зависит от критичности объекта контроля, класса чистоты помещения (зоны), площади контролируемого объекта, ожидаемого уровня микробной контаминации и др. Производителю следует самостоятельно выбрать значение площади смыва в пределах 25 - 100 см², основываясь на принципах управления рисками для качества, а также учитывая процент извлечения, установленный при валидации метода смыва.

70. В качестве среды для увлажнения тампона (сваба) следует использовать фосфатный буферный раствор с натрия хлоридом и пептоном (pH 7.0) или 0,9% раствор натрия хлорида (физиологический раствор) или иную допустимую среду промышленного производства, поставляемую в пробирках со стерильными тампонами (свабами).

71. Объем стерильной среды в пробирке.

При посеве смыва на питательную среду поверхностным методом (штрихом) объем стерильной среды в пробирке должен быть достаточным только для увлажнения тампона (сваба) (1 - 2 мл). Не допускается после отбора смыва погружать тампон (сваб) в стерильную среду, содержащуюся в пробирке.

При посеве смыва глубинным методом объем стерильной среды в пробирке должен быть достаточным для ополаскивания тампона (сваба) (2 - 10 мл). При интерпретации результатов необходимо учитывать объем, взятый для посева, и общий объем среды в пробирке. Например, при посеве 1 мл смывной жидкости, полученной путем ополаскивания тампона в 10 мл стерильной среды, следует провести пересчет, умножив полученный результат на 10.

72. Техника взятия смыва.

На месте взятия смыва тампон (сваб), наклонив пробирку, увлажняют стерильной средой, содержащейся в пробирке. Смыв производят тампоном (свабом), расположенным под наклоном к контролируемой поверхности, как показано на рисунке 2, тщательно протирая поверхность аккуратными движениями близко расположенными линиями-штрихами, исключая просветы между штрихами. Затем такими же движениями производят смыв в направлении, перпендикулярном предыдущему направлению (как показано на рисунке 3).

Рисунок 2. Расположение тампона (сваба)

при выполнении смыва.

Рисунок 3. Направление движений тампона (сваба)

при выполнении смыва.

73. Поверхностный метод посева (штрихом).

До начала посева тампон (сваб) должен оставаться влажным. Посев осуществляется влажным тампоном по всей поверхности агара в чашке Петри параллельными близко расположенными линиями в одном направлении, не меняя степень нажатия, но прокручивая тампон (сваб) вдоль оси. Каждое новое движение не должно перекрывать предыдущее, как показано на рисунке 4.

Следует учитывать, что результат может зависеть от техники исполнения: угол наклона тампона (сваба), сила давления на тампон, количество сделанных штрихов и др.

Рисунок 4. Направление движений тампона (сваба)

при выполнении посева.

74. Глубинный метод посева.

Перед проведением посева тампон (сваб) тщательно ополаскивают с целью извлечения микроорганизмов в смывную жидкость. Посев производят глубинным методом согласно требованиям Фармакопеи Союза.

В случае подтвержденного валидацией ингибирующего воздействия остаточного количества антимикробного вещества, попадающего в смывную жидкость при отборе пробы, которое не удалось устранить другими методами, рекомендуется использовать метод мембранной фильтрации.

75. Метод отпечатка.

Отбор проб производится с обеих рук. Для каждой руки используется 1 контактная пластина или чашка Петри. Для микробиологического мониторинга рук в перчатках следует поочередно сделать отпечатки пяти пальцев обеих рук на поверхность агара (контактной пластины или чашки Петри). Чтобы касание было полным, поочередно сделать касание не менее 5 секунд каждым пальцем обеих рук по поверхности агара таким образом, чтобы отпечатки не накладывались друг на друга (как показано на рисунке 5).

Рисунок 5. Техника отбора проб методом отпечатка.