Безопасная техника работы в БМБ III класса при проведении индикации маркеров вирусов I группы патогенности, а также биологического агента, таксономическое положение которого не определено

4.38. Разбор проб, первичная подготовка материала, перевод в жидкую фазу, разделение проб на аликвоты, обеззараживание проб для молекулярно-генетических исследований, приготовление и фиксация мазков для метода флуоресцирующих антител (далее - МФА), проведение иных подготовительных работ, а также выполнение всех этапов исследований с необеззараженным материалом, например, проведение иммуноферментного анализа (далее - ИФА) с целью индикации маркеров вирусов I группы патогенности или биологического агента, таксономическое положение которого не определено, а степень опасности не изучена, выполняются в БМБ III класса в защитном костюме I типа или аналоге <31>.

--------------------------------

<31> Подпункт 3 пункта 344, приложение 3 СанПиН 3.3686-21.

Обработка и обеззараживание исследуемого материала для индикации с использованием методов амплификации нуклеиновых кислот (далее - МАНК) проводятся в соответствии с методическими документами <32>.

--------------------------------

<32> Приложение 5 МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I - IV групп патогенности", утвержденных руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 22.12.2009.

4.39. До начала работы в БМБ на столешнице рабочей камеры бокса размещаются необходимое оборудование и расходные материалы, поддон, покрытый салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором. Проверяются исправность оборудования, наличие дезинфицирующих средств, пакетов и емкостей для сброса и удаления отходов.

Предметы в рабочей камере БМБ III класса располагаются в зависимости от того, с какой стороны выполнен проходной шлюз для передачи предметов в рабочую камеру и из нее. При устройстве проходного шлюза справа, наиболее "загрязненные" предметы, емкости с дезинфицирующим раствором, колба ловушка размещаются справа. Слева размещаются наиболее "чистые" предметы, емкости с салфетками (тампонами), перманентным маркером, штативы с наконечниками или оборудование, необходимое на отдельных этапах исследования (например, твердотельный термостат, центрифуга, центрифуга-встряхиватель). В центре располагаются штатив с дозаторами (пипетаторами, дозирующими устройствами) и поддон с салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, для размещения штатива с пробами, а также, при необходимости, стакан с необходимыми инструментами, спиртовая горелка, стакан с 95% этиловым спиртом.

4.40. Перед началом работы БМБ III класса визуально проверяется на наличие отрицательного давления в рабочей камере бокса (показания регистрируются в журнале учета).

4.41. Все работы с ПБА проводятся только над поддоном.

Обработка дезинфицирующим раствором предметов и поверхностей в рабочей камере БМБ проводится путем протирания, при этом салфетка или тампон, смоченные дезинфицирующим раствором, удерживаются с помощью пинцета или корнцанга.

Доставленный на исследование материал в транспортировочном контейнере, биксе или сумке-холодильнике (далее - внешний контейнер) через проходной шлюз БМБ III класса передается в рабочую камеру бокса и устанавливается на поддон. Внутренняя дверь шлюза плотно закрывается, после чего осуществляются вскрытие внешнего контейнера и извлечение вторичного контейнера, содержащего емкости с исследуемым материалом. Если габаритные размеры внешнего контейнера не позволяют передать его через шлюз, то он может вскрываться на поддоне, расположенном на рабочем столе в боксированном помещении.

Перед вскрытием внешнего контейнера номер печати или номер на пломбе сверяется с номером, указанным в акте передачи, опечатывающее устройство снимается. Вторичный контейнер, внутренние стенки внешнего контейнера, хладоэлементы, уплотняющие вставки протираются салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором. Вторичный контейнер помещается на поддон. Внешний контейнер, при необходимости, удаляется из БМБ.

В случае вскрытия внешнего контейнера вне БМБ вторичный контейнер помещается в камеру передаточного шлюза БМБ и после УФ-облучения переносится на поддон в рабочую камеру бокса.

После вскрытия вторичного контейнера визуально оценивается целость первичной упаковки (далее - емкостей с исследуемым материалом). Емкости с исследуемым материалом протираются салфеткой (тампоном), смоченной дезинфицирующим раствором, и помещаются в штатив соответствующего размера и назначения на поддон.

После освобождения вторичного контейнера его внешняя и внутренняя поверхность обеззараживаются путем протирания дезинфицирующим раствором, контейнер, при необходимости, помещается в проходной шлюз, подвергается дополнительному УФ-облучению и после экспозиции удаляется из БМБ.

Пробы разбираются в соответствии с направлениями на исследование, данные регистрируются.

С целью исключения загрязнения перчаток и контаминации проб, для открытия или закрытия (откручивания или завинчивания) крышек емкостей, содержащих исследуемый материал, рекомендуется использовать пинцеты или корнцанги. При этом основная часть емкости располагается в руке сотрудника, а крышка открывается или закрывается с использованием пинцета или корнцанга. Снятая крышка помещается на салфетку, смоченную дезинфицирующим раствором, внутренней стороной вверх. Далее открытая емкость, содержащая исследуемый материал, ставится в соответствующий штатив. В емкость с пробой дозатором (пипетатором) медленно по стенке избегая разбрызгивания, вносится разводящая жидкость (например, специальная транспортная среда). После смешивания содержимого, дозирующим устройством отбирается необходимый объем пробы, который переносится в пробирку для обеззараживания.

Емкости с обеззараженными пробами для дальнейшего исследования МАНК протираются салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, и ставятся в штатив с крышкой. Штатив также протирается салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, и помещается в проходной шлюз для дополнительного обеззараживания поверхности УФ-облучением. После экспозиции пробы передаются для дальнейших этапов исследования.

Фиксированные и просушенные мазки для МФА складываются в транспортный контейнер, который после обработки дезинфицирующим раствором помещается в проходной шлюз БМБ для дополнительного обеззараживания поверхности УФ-облучением. После экспозиции контейнер передается для дальнейших этапов исследования.

4.42. По окончании работ:

- первичные емкости, содержащие исследуемый материал, обрабатываются снаружи путем протирания салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, и упаковываются в контейнер для хранения, на дне которого расположен адсорбирующий материал. После обработки поверхности контейнера дезинфицирующим раствором, он помещается в проходной шлюз БМБ, где дополнительно обеззараживается УФ-облучением, и, после завершения экспозиции, переносится в холодильник или морозильную камеру (при необходимости первичные емкости помещаются в сосуд Дьюара) для резервного хранения;

- салфетка, расположенная на поддоне с использованием пинцетов, складывается и погружается в емкость с дезинфицирующим раствором;

- все приборы, расходные материалы, поддон, а также столешница, задняя и боковые поверхности, фронтальное стекло и перчатки БМБ обрабатываются дезинфицирующим раствором. Особое внимание при обработке уделяется углам рабочей камеры БМБ;

- поверх отработанных расходных материалов помещается пластина-гнет, и емкость с дезинфицирующим раствором закрывается. Включается УФ-облучатель БМБ.

4.43. После экспозиции БМБ III класса готовится к возобновлению работ:

- вынимаются емкости с отработанными расходными материалами;

- поверхности рабочей камеры бокса и оборудование протираются салфеткой, смоченной дистиллированной водой;

- включается УФ-облучение. После экспозиции БМБ готов к работе.