2.3 Лабораторные диагностические исследования

- Рекомендовано определение активности АГАЛ в пятнах крови, высушенных на фильтровальной бумаге или в лейкоцитах крови всем пациентам мужского пола (в том числе и на доклинической стадии) для подтверждения диагноза [16, 26, 28, 29, 37].

Уровень убедительности рекомендации - A (уровень достоверности доказательств 3).

Комментарии: У мужчин сниженная активность АГАЛ является достаточно информативным признаком БФ. Однако у трети женщин с БФ активность этого фермента может быть в норме [17], поэтому при проведении ферментного теста женщинам это нужно учитывать. Правила забора биоматериала для проведения исследований в пятнах высушенной крови приведены в Приложении Г6.

- Рекомендовано проведение молекулярно-генетического исследования для всех пациентов со сниженной активностью фермента АГАЛ и для лиц женского пола при клиническом подозрении на БФ и при наличии родственников с БФ в родословной: выявление мутаций в гене GLA, кодирующем АГАЛ для подтверждения диагноза на молекулярно-генетическом уровне у мужчин со сниженной активностью фермента и для женщин с клиническими признаками БФ или родственников пробанда по материнской линии [1, 17, 26, 28, 29].

Уровень убедительности рекомендации - B (уровень достоверности доказательств 3).

Комментарии: При получении положительного или сомнительного результата ферментного теста у мужчин и у женщин проводится подтверждающий молекулярно-генетический анализ гена GLA. Широкое распространение аллелей псевдодефицита (например, p.D313Y), приводящих к сниженной активности АГАЛ в сухом пятне крови и, иногда пониженной, - в лейкоцитах и плазме крови, обуславливает обязательное включение молекулярно-генетического анализа в лабораторную диагностику БФ.

Выявление семейной мутации гена GLA делает возможным обследование родственников пробанда, выявление гетерозиготных носительниц БФ, а также проведение пренатальной и преимплантационной диагностики. Большинство мутаций у пациентов с БФ могут быть выявлены с помощью секвенирования всех экзонов и приэкзонных участков интронов по Сэнгеру, но в небольшом проценте случаев мутацию с применением стандартных методов обнаружить не удается.

- Рекомендовано всем пациентам с клинической картиной БФ - определение концентрации глоботриаозилсфингозина (Lyso-GB3) в пятнах высушенной крови или плазме крови для биохимического подтверждения диагноза [10, 30, 38].

Уровень убедительности рекомендации - B (уровень достоверности доказательств 3).

- Рекомендовано определение концентрации Lyso-GB3 в пятнах высушенной крови или плазме крови всем пациентам с установленным диагнозом БФ перед началом терапии и на фоне ферментной заместительной терапии (ФЗТ) для биохимического контроля лечения [10, 30, 31, 38].

Уровень убедительности рекомендации - B (уровень достоверности доказательств 3).

Комментарии: Количественное определение этого биомаркера позволяет выявлять не только мужчин, но и женщин с БФ, что полезно для уточнения клинического статуса женщин - гетерозигот, а также для разрешения трудных диагностических случаев. Второе важное применение Lyso-GB3 - это мониторинг состояния и эффективности терапии пациентов с БФ. Показано, что при адекватной ФЗТ количество субстрата в плазме крови уменьшается. Поэтому целесообразно сделать количественное определение Lyso-GB3 частью мониторинга состояния пациентов с БФ, как находящихся на патогенетической терапии, так и живущих без ФЗТ. Однако следует учитывать, что даже у пациентов, получающих ФЗТ, уровень этого метаболита практически никогда не достигает нормальных значений. Правила забора биоматериала для проведения исследований в пятнах высушенной крови приведены в Приложении Г6.

- Не рекомендуется проведение биопсии и патолого-анатомического исследования тканей почки и сердца для пациентов с клиническим подозрением на БФ для подтверждения диагноза [13, 26, 29].

Уровень убедительности рекомендации - C (уровень достоверности доказательств 5).

Комментарии: Несмотря на то, что данные методы исследования могут быть использованы для дифференциальной диагностики БФ, предпочтение должно отдаваться менее интервенционным методам исследования, таким как ферментная диагностика или молекулярно-генетическое обследование.

- Рекомендовано проведение лабораторных исследований согласно клиническим рекомендациям по ведению пациентов с ХПН при наличии у пациента с БФ признаков поражения почек с целью оценки состояния почек не реже 1 раза в 6 месяцев [26, 28, 29].

Уровень убедительности рекомендации - C (уровень достоверности доказательств 5).

- Рекомендовано проведение лабораторных исследований согласно клиническим рекомендациям по ведению пациентов гипертрофической кардиомиопатией (КР283) при наличии у пациента с БФ признаков поражения сердечной мышцы [13, 26, 28, 29].

Уровень убедительности рекомендации - C (уровень достоверности доказательств 4).

- Рекомендовано вне зависимости от клинических проявлений регулярное определение количества белка и альбумина в суточной моче (микроальбуминурии/протеинурии), а также проведение оценки уровня расчетной скорости клубочковой фильтрации (СКФ) исходно и далее не реже 1 раза в 6 месяцев всем пациентам с установленным диагнозом БФ и бессимптомным пациентам, выявленным при семейном скрининге для выявления патологии почек [26, 28, 29, 39].

Уровень убедительности рекомендации - B (уровень достоверности доказательств 2)