Данный документ включен в перечень НПА, на которые не распространяется требование об отмене с 01.01.2021, установленное ФЗ от 31.07.2020 N 247-ФЗ.

4.1.5.2. Учет и анализ результатов

4.1.5.2. Учет и анализ результатов. В течение первых двух часов наблюдение проводится регулярно: сначала каждую минуту, затем - через 5, далее - через 10 минут. Позже можно ограничиться просмотром через полчаса до конца первого рабочего дня. Со следующего дня просмотр проводится ежедневно.

Через сутки, через двое, на 5-е и 10-е сутки проводится полный анализ с просмотром под бинокуляром и описанием состояния каждой особи. Если имеются данные, что возможна задержка роста дафний, они должны регулярно измеряться под бинокуляром.

Дафнии подразделяются на следующие возрастные группы:

o м - молодые самки до начала созревания гонад (первый абдоминальный

+ 1

отросток не начал отгибаться вперед);

o м - молодые самки с начавшими развиваться гонадами (первый

+ 2

абдоминальный отросток начал отгибаться вперед);

o ял. - взрослые яловые самки, у которых в выводковой камере

+

(в марсупии) должны быть, но отсутствуют зародыши или на спине нет

эфилпиума;

o я - взрослые самки с яйцами или зародышами в выводковой камере;

+

o яМs - самки с яйцами и зародышами разного возраста и размера

+

(нарушение развития части яиц);

o э - самки с эфиппиумом на спине и латентными яйцами в гонадах;

+

/\

o м - молодые самцы до начала развития вторичных признаков, у них, в

1

отличие от самок того же возраста, несколько "бульдожий" вид и вздутые

антеннулы;

/\

o м - молодые самцы с началом роста антеннул (они вытянуты, но не

2

развиты полностью) и с образованием расширения на нижней щели раковины;

/\

o - взрослые самцы с полностью развитыми антеннулами, с опушенным

расширением в середине брюшной щели раковины и длинным жгутом на первых

абдоминальных ножках.

Если под влиянием нервно-паралитического яда у дафний происходит судорожное сокращение продольных мышц абдомена, особенно когда это сопровождается опорожнением кишечника и выбрасыванием из выводковой камеры яиц или зародышей, ставят букву "Т" (тетанус). Обязательно отмечают случаи побеления (коагуляции белков), в первую очередь жаберных отростков абдоминальных ножек.

Такие отметки делают при беглом просмотре дафний. При тщательном обследовании под бинокуляром регистрируется численность (2 раза в неделю в момент замены растворов):

/\ /\

а) молоди м1 и м2 (отдельно oм ; oм ; o м и o м );

+ 1 + 2 1 2

/\

б) взрослых самцов (o );

в) самок с партеногенетическими яйцами (oя);

+

г) "яловых" самок (явно половозрелых, но с пустовыводной камерой, если

гонады не набиты партеногенетическими яйцами) (oял.);

+

д) самок с эфиппиумами (oэ).

+

Кроме того, учитываются случаи уродливого развития яиц в выводковой камере, сброшенные недоразвитые яйца и зародыши, сброшенные эфиппиумы (если в них нет латентных яиц) и суммарный вес живых дафний.

Один-два раза в течение эксперимента, лучше всего на 10 - 15-е сутки

(фаза логарифмического роста) и при достижении биомассы насыщения (на 25 -

28-е сутки) целесообразно в качестве дополнительных показателей провести

полный биологический анализ дафний с регистрацией по 15 особей oм , oм

+ 1 + 2

и взрослых.

Отдельно должны учитываться все уродливые особи. Желательно пересадить их в чистую воду и проследить за их дальнейшей судьбой и за их потомством.

Как правило, наиболее чувствительным показателем является биомасса дафний в момент достижения максимальных значений в контроле и при минимальных концентрациях вещества в опыте. Если обнаруживаются нарушения в развитии партеногенетических или латентных яиц, ПДК вещества должна устанавливаться по этому показателю.

Об упитанности дафний и накоплении гемоглобина при снижении в воде содержания растворенного кислорода можно судить по цвету тела и количеству капель жира. Иногда у дафний появляется зеленовато-голубоватая окраска, особенно яиц и зародышей в выводковой сумке, расположенной между створками раковины на спинной стороне и абдоменом рачка. Обычно этот цвет приписывают каротиноидам, накапливаемым в заметных количествах.

Ниже приведены некоторые формы записи и интерпретации результатов опытов с дафниями (Таблицы 4.1.2 - 4.1.6 и Формы 3 - 5).

При внесении в таблицу в числителе записывают состояние яиц в гонадах, а в знаменателе - состояние яиц, зародышей в выводковой камере или в эфиппиуме на ней. Выделяют следующие градации степени повреждающего действия:

E - реакции дафний, не связанные с их повреждением;

1

E - легкие повреждения, не связанные с опасностью для существования

2

особи;

E - повреждения средней тяжести;

3

E - тяжелые повреждения;

4

E - гибель рачков и предшествующие ей симптомы (иммобилизация,

5

тетанические сокращения туловища, параличи и т.п.).