Определение титра ботулинического токсина

--------------------------------

<30> ГОСТ 10444.7-86.

3.50. Для определения титра ботулинического токсина используют ПП, содержащую ботулинический токсин, или ППТ. Пипетирующим устройством по 1 мл ПП или ППТ, переносят в две пробирки; в одну стерильной пипеткой добавляют 1 мл, получая разведение 1:1, в другую - 9 мл буферного желатино-фосфатного раствора, получая разведение 1:9. Из пробирки с пробой, разведенной в 10 раз, пипетирующим устройством отбирают 1 мл и переносят в третью пробирку, в которую стерильным пипетирующим устройством добавляют 9 мл раствора желатино-фосфатного буфера, получая разведение 1:99. При ограниченном объеме ПП из нее готовят те же разведения, но получают вышеуказанные соотношения между исходной жидкостью и желатино-фосфатным буфером, используя меньший объем ПП и раствора желатино-фосфатного буфера. С полученными разведениями ПП (или ППТ) ставят биологические пробы в порядке, приведенном в таблице 4. Опытным путем подбирают такие разведения ПП или ППТ, при введении которых погибают все мыши, и последующие разведения, при которых мыши не погибают. Если использование 10-кратных разведений не приводит к гибели всех мышей ни в одном из разведений, то для определения титра ботулинического токсина готовят 6- или 4-кратные разведения ПП или ППТ. По наибольшему разведению пробы, вызвавшему гибель всех мышей, вычисляют число мышиных минимальных летальных доз (далее - МЛД) ботулинического токсина в 1 мл ПП с последующим пересчетом на продукт.