Амплификация ДНК (постановка ПЦР)

7.8. Проводится в зоне 2 - помещении для раскапывания реагентов и проведения ПЦР.

7.9. ПЦР-детекция M. hominis, M. pneumoniae, M. genitalium проводится с использованием зарегистрированных в Российской Федерации классических тест-систем и мультиплексных систем в соответствии с инструкцией по их применению.

7.10. При детекции M. genitalium рекомендуется использование метода минипулов. Препараты ДНК, выделенные из субстратов от трех (четырех, пяти) человек, смешивают в равных объемах таким образом, чтобы получился объем, который указан в наставлении к ПЦР-тест-системам, как объем исследуемого образца, вносимый в реакционную смесь. Например, если объем исследуемого образца 10 мкл, то от 5 человек берут по 2 мкл раствора ДНК; от 4 человек - по 2,5 мкл; от 3 человек - 3,3 мкл.

7.11. При использовании тест-систем, основанных на принципе ПЦР-РВ, результат регистрируется непосредственно в процессе амплификации.

7.12. При использовании тест-систем, основанных на принципе ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией "по конечной точке", после завершения амплификации проводят измерение сигнала флюоресценции в образцах на флюориметрах по типу "АЛА-1/4" или его аналогах.

7.13. При использовании классических ПЦР-тест-систем, зарегистрированных на территории Российской Федерации, выявление продукта амплификации производится методом электрофореза в агарозном геле.