Гистологическое и иммуногистохимическое исследование

- Морфологическое исследование материала рекомендовано проводить в соответствии с Международной гистологической классификацией опухолей кожи ВОЗ.

Уровень убедительности рекомендаций - B (уровень достоверности доказательств - IIa)

- Комментарии: Операционный/биопсийный материал первичных и/или метастатических опухолей фиксируют в нейтральном забуференном 10% растворе формалина и заключают в парафин по обычной методике. Срезы с парафиновых блоков окрашиваются гематоксилином и эозином для проведения рутинного гистологического исследования. Для оценки гистологического строения первичных опухолей кожи, также морфологических особенностей регионарных метастазов исследуют парафиновые срезы, окрашенные гематоксилин-эозином.

Оценка проводится по следующим морфологическим параметрам: а) гистологическое строение опухоли, б) глубина инвазии или толщина (возможно по Бреслоу), в) сосудистая и периневральная инвазия, г) митотический индекс. Для первичный опухолей обязательно указание размера первичного очага и его распространение на подлежащую мышцу, фасцию, кость или хрящ.

- Рекомендуется для иммуногистохимического исследования серийные парафиновые срезы толщиной 3 - 5 мкм депарафинировать и регидратировать по стандартной схеме. ИГХ исследование проводят по стандартной методике с применением специфических антител к маркерам эпителиальной дифференцировки - цитокератину AE1/3, цитокератину 18, цитокератину 20 (ЦК20), маркерам нейроэндокринной дифференцировки - хромогранину A (ХрA), синаптофизину (Син), CD56 и антигену клеточной пролиферации Ki 67. "Золотым стандартом" диагностики является определение экспрессии цитокератина 20 [17 - 20].

Уровень убедительности рекомендаций - B (уровень достоверности доказательств - IIa)

- Рекомендуется в качестве дополнительного маркера возможной чувствительности опухоли к аналогам соматостатина определение экспрессии рецепторов соматостатина 2 типа (SSTR2) с использованием моноклональных антител к SSTR2A (клон UMB-1) ("Epitomics").

Уровень убедительности рекомендаций - C (уровень достоверности доказательств - IV)

- Комментарии: Оценку иммунореактивности проводят в соответствии с системой, предложенной M. et al. [21]. Учитывается только мембранное окрашивание опухолевых клеток. Реакция считается негативной (0) при отсутствии окрашивания и позитивной (+) при окрашивании более 10% опухолевых клеток. При этом позитивную иммунореактивность оценивают как 1+ при слабом окрашивании мембран, наблюдаемом при большом увеличении микроскопа (x400), 2+ - при сильном, но неполном мембранном окрашивании и 3+ при сильном полном окрашивании всей мембраны опухолевых клеток. Оценка реакции "2+/3+" соответствует высокому уровню экспрессии рецепторов и "0/1+" - низкому уровню иммунореактивности. Высокий уровень мембранной экспрессии рецепторов коррелирует с чувствительностью опухоли к лечению аналогами соматостатина. Цитоплазматическая реакция не учитывается при анализе экспрессии рецепторов в опухоли [21 - 23].

Критерии оценки иммунореактивности:

1. Только мембранное окрашивание; 2. Полнота охвата клеточной мембраны; 3. Процент окрашенных клеток опухоли; 4. Интенсивность окрашивания.

Позитивная иммунореактивность оценивалась от 1 до 3 баллов.

Система оценки экспрессии рецепторов представлена в таблице 1.