V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование и материалы

--------------------------------

<4> Примечание: допускается использование средств измерений, вспомогательного оборудования и материалов с аналогичными или лучшими характеристиками; допускается использование других реактивы с аналогичными характеристиками.

5.1. Лаборатория, использующая методы амплификации нуклеиновых кислот, в соответствии с этапами проведения анализа включает рабочую зону 1 - для выделения (экстракции) нуклеиновых кислот, рабочую зону 2 - для проведения реакции амплификации и учета результатов амплификации при использовании гибридизационно-флуоресцентного метода детекции, рабочую зону 3 - для детекции продуктов амплификации методом электрофореза в агарозном геле.

5.1.1. Зона 1 - для выделения ДНК из исследуемого материала необходимы:

- бокс абактериальной воздушной среды биологической безопасности II или III класса биологической защиты;

- микроцентрифуга/вортекс;

- настольная центрифуга для микропробирок (по типу Эппендорф или аналоги) объемом 1,5 - 2 мл до 10000g;

- твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 - 100 °C;

- вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой;

- отдельный набор автоматических пипеток переменного объема;

- одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки объемом 1,5 мл или 2,0 мл;

- одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема до 200 мкл;

- одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема с фильтром до 100, 200 и до 1000 мкл;

- штативы для наконечников, микропробирок на 1,5 мл;

- холодильник с камерами, поддерживающими температуру от плюс 2 до 8 °C и не выше минус 16 °C (для хранения наборов, предназначенных для выделения нуклеиновых кислот).

- холодильник с камерой, поддерживающей температуру от плюс 2 до 8 °C (для хранения препаратов нуклеиновых кислот). Не допускается хранение препаратов нуклеиновых кислот в одном холодильнике с компонентами набора для выделения нуклеиновых кислот;

- пробирки типа Эппендорф или аналоги;

- емкость с дезинфицирующим раствором;

- отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки <5>.

--------------------------------

<5> МУ 1.3.2569-09.

- одноразовые пластиковые контейнеры для сброса и инактивации материалов.

5.1.2. Зона 2 - для проведения ПЦР-амплификации <6> необходимы:

--------------------------------

<6> Примечание: с целью автоматизации процедуры приготовления реакционных смесей для амплификации допускается использование автоматизированного оборудования для раскапывания реагентов.

- бокс абактериальной воздушной среды биологической безопасности II и III класса или настольный бокс с бактерицидной лампой (ПЦР-бокс; УФ-бокс);

- программируемые термоциклеры;

- флюориметр типа "АЛА1/4" или его аналоги (при использовании тест-систем, основанных на принципе ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией "по конечной точке");

- микроцентрифуга/вортекс;

- отдельный набор автоматических пипеток переменного объема;

- одноразовые полипропиленовые пробирки для амплификации объемом 0,5 (0,2) мл;

- одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с фильтром до 10 мкл, 100 мкл и 200 мкл, свободные от ДНКаз;

- штативы для наконечников, микропробирок на 0,5 (0,2) мл;

- холодильник с камерой, поддерживающей температуру от плюс 2 до 8 °C, и с морозильной камерой не выше минус 18 °C;

- емкость для сброса отработанных расходных материалов;

- отдельный халат и одноразовые перчатки <7>;

--------------------------------

<7> МУ 1.3.2569-09.

5.1.3. Зона 3 - для детекции продуктов амплификации методом электрофореза в агарозном геле необходимы:

- камера для горизонтального электрофореза;

- источник постоянного тока с напряжением 150 - 400 В;

- ультрафиолетовый трансиллюминатор с кабинетом для просмотра гелей;

- видеосистема с цифровой камерой для регистрации результатов (система гель-документирования);

- вортекс;

- микроволновая печь для плавления агарозы;

- холодильник с камерой, поддерживающей температуру от плюс 2 до 8 °C;

- весы электронные от 0,1 мг до 1,0 кг;

- колба коническая из термостойкого стекла для плавления агарозы на 250 мл;

- мерный цилиндр на 1 л;

- штатив для микропробирок на 0,5 (0,2) мл;

- отдельный набор автоматических пипеток переменного объема;

- одноразовые наконечники до 200 мкл в штативе;

- емкость для сброса наконечников;

- пластиковая емкость на 5 л для дезактивации буфера и гелей, содержащих бромид этидия;

- одноразовые халат, шапочка, сменная обувь, одноразовые перчатки <8>.

--------------------------------

<8> МУ 1.3.2569-09.

5.2. Наборы реагентов для обработки клинического материала: комплекты реагентов и тест-систем, зарегистрированные и разрешенные для использования на территории Российской Федерации в установленном порядке, для выделения ДНК из мочи, слюны, слезного отделяемого, основанные на лизисе клеток детергентами и сорбции нуклеиновых кислот.

5.3. Наборы реагентов для постановки ПЦР: ПЦР-тест-системы, зарегистрированные и разрешенные для использования на территории Российской Федерации, для выявления M. pneumoniae, M. hominis, M. genitalium, имеющих внутренний контроль ингибирования ПЦР и систему антиконтаминационной модификации ампликонов, которые уменьшают вероятность получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов.

Рекомендуется использовать тест-системы, основанные на принципе ПЦР в режиме реального времени (ПЦР РВ), позволяющие в мультиплексном формате одновременно обнаруживать M. hominis, M. genitalium, Ureaplasma ssp.

5.4. Набор реагентов для проведения электрофореза в агарозе: комплекты реагентов для качественной электрофоретической детекции продуктов амплификации в агарозном геле, содержащие агарозу для электрофореза, компоненты буфера для электрофореза, интеркалирующий агент-краситель.

5.5. Для обеспечения санитарно-эпидемического режима в лаборатории при работе с возбудителями III - IV групп патогенности и для предотвращения контаминации продуктами амплификации используются стандартные дезинфицирующие растворы в соответствии с санитарно-эпидемиологическими требованиями <9> и методическими указаниями <10>.

--------------------------------

<9> СП 1.3.2322-08.

<10> МУ 1.3.2569-09.