Приложение 3

к МР 1.2.0344-24

ПРИМЕР
ПРОГРАММ ГРАДИЕНТНОГО ЭЛЮИРОВАНИЯ ДЛЯ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОГО
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО РАЗДЕЛЕНИЯ ФРАКЦИЙ ПОЛЯРНЫХ И НЕПОЛЯРНЫХ
ВЕЩЕСТВ ПРОБ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

3.1 Хроматографическое разделение фракций полярных веществ осуществляют в градиентном режиме с использованием колонки с гидрофильным сорбентом. Состав подвижных фаз: A - раствор уксусной кислоты 5 ммоль/л в воде; B - раствор уксусной кислоты 5 ммоль/л в ацетонитриле. Для колонки с размерами 150 x 2,1 мм и зернением частиц сорбента 1,8 микрон программу градиента устанавливают: 0 - 2.5 мин - 90% B; 2,5 - 10 мин - снижение до 50% B; 10 - 15 мин - удержание 50% B; 15 - 20 мин - возврат к 90% B. Скорость потока элюента - 0,4 см³/мин, вводимый объем пробы 5 мм³ [17].

3.2 Хроматографическое разделение фракций неполярных веществ осуществляют в градиентном режиме с использованием колонки, наполненной сорбентом с привитой фазой C18. Состав подвижных фаз: A - раствор муравьиной кислоты 0,1% в воде; B - раствор муравьиной кислоты 0.1% в ацетонитриле. Для колонки с размерами 100 x 2,1 мм и зернением частиц сорбента 1,7 микрон, программу градиента устанавливают следующей: 0 - 5 мин - удержание 5% B; 5 - 25 мин - повышение до 35% B; 25 - 35 мин - повышение до 70% B; 35 - 36 мин - повышение до 100% B; 36 - 39 мин - удержание 100% B; 39 - 42 мин - возврат к 5% B. Скорость потока элюента - 0,4 см³/мин, вводимый объем пробы 5 мм³ [17].