V. Забор проб биологического материала у лабораторных животных

V. Забор проб биологического материала

у лабораторных животных

5.1. При сборе биоматериала для метаболомного исследования необходимо максимально быстро остановить метаболические процессы в тканях и жидкостях лабораторных животных, для того чтобы минимизировать изменения химического состава, не относящиеся к изучаемому воздействию [9].

5.2. В качестве материала для анализа крови лабораторных животных может использоваться как сыворотка, так и плазма. Забор крови осуществляется единообразно: из одного кровеносного сосуда, в одинаковом количестве (от 100 мм3 до 1 см3) и в однотипные емкости - пробирки типа "Эппендорф" соответствующей вместимости [10, 11]. Место пункции очищают, не допуская попадания в пробу посторонних веществ. В качестве антикоагулянта для получения плазмы применяют гепарин, т.к. данное вещество оказывает наименьшее влияние на состав пробы. Отделение сыворотки и плазмы проводят при температуре плюс 4 °C, полученный материал разделяют на порции объемом по 100 мм3 в отдельные пластиковые пробирки. Одновременно с этим создают образец контроля (далее - ОК) - смесь равных объемов биоматериала, взятых от всех проб из эксперимента. ОК также разделяют на порции по 100 мм3. Отобранный материал замораживают в жидком азоте и хранят до момента анализа при температуре минус 80 °C.

5.3. Органы и ткани сразу после извлечения промывают в изотоническом растворе 0,09% хлорида натрия и замораживают в жидком азоте с последующим хранением при температуре минус 80 °C. Описание приготовления ОК для образцов тканей представлено в п. 6.8.