IV. Определение класса опасности химических веществ, обладающих сенсибилизирующим действием

4.1. Сенсибилизаторы кожные и респираторные относят к 1 классу опасности. Внутри класса по степени выраженности реакций сенсибилизаторы подразделяются на сильные сенсибилизаторы (подкласс 1A) и другие сенсибилизаторы (умеренные и слабые) (подкласс 1B).

4.2. Определение класса опасности респираторных и кожных сенсибилизаторов проводится в соответствии с критериями, установленными в табл. 4.1 и 4.2.

Таблица 4.1

Определение класса опасности химических веществ,

обладающих кожным сенсибилизирующим действием

Таблица 4.2

Определение класса опасности химических веществ,

обладающих респираторным сенсибилизирующим действием

4.3. Определение класса опасности респираторных и кожных сенсибилизаторов проводится на основе оценки весомости доказательств с учетом адекватности и надежности результатов исследований.

4.4. Определение класса опасности респираторных и кожных сенсибилизаторов целесообразно проводить при наличии надежных и качественных свидетельств воздействия на организм человека (данные эпидемиологических исследований, описания случаев профессиональных воздействий) и (или) наблюдений, полученных в экспериментах на животных.

4.5. Определение класса опасности должно основываться на взаимоприемлемых данных (результатах), полученных с использованием методов и (или) установленных подходов, подтвержденных в соответствии с национальными <13> и (или) международными процедурами <14>.

--------------------------------

<13> МУ 1.1.578-96 "Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы", утвержденные Первым заместителем Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 21.10.1996 (далее - МУ 1.1.578-96).

<14> ОЭСР.

4.6. При отсутствии достаточных данных для отнесения к подклассам, вещества следует относить к классу опасности 1.

4.7. Достоверно подтвержденные новые данные учитываются в рамках общей оценки весомости доказательств и могут служить основанием для пересмотра установленного класса опасности.

4.8. Определение класса опасности кожных сенсибилизаторов.

4.8.1. Определение класса опасности кожных сенсибилизаторов на основании данных, полученных на людях.

4.8.1.1. Отнесение химического вещества к сенсибилизатору класса опасности 1 проводится на основе эпидемиологических данных с учетом:

- протокола тестирования (дизайн исследования, наличие контрольной группы);

- информации о веществе (индивидуальное вещество или в составе смеси);

- степени воздействия (доза на квадратный сантиметр или концентрация, частота и продолжительность);

- влияния на здоровье работников;

- частоты последствий (в зависимости от числа подвергшихся воздействию лиц);

- сохранения или отсутствия последствий для здоровья (объективное описание и оценка);

- наличия мешающих факторов, в том числе ранее выявленные кожные заболевания, медикаментозное лечение, наличие других кожных сенсибилизаторов);

- актуальности в отношении размера группы, статистики, документации.

Дополнительной информацией являются данные результатов патч-тестов, проведенных у пациентов дерматологических отделений с целью выявления конкретного аллергена.

4.8.1.2. Отнесение химического вещества к подклассам 1A и 1B по кожной сенсибилизации на основании данных на людях проводится в соответствии с критериями табл. 4.3.

4.8.1.3. Отнесение химического вещества к подклассу 1A и 1B проводится на основании надежных и актуальных данных о пороговых концентрациях специфического сенсибилизирующего действия, полученных в многократных патч-тестах на людях (многократная кожная аллергическая проба у человека (англ. Human Repeat Insult Patch Test, далее - HRIPT), максимизационное испытание у человека (англ. Human maximisation test, далее - HMT) в соответствии с критериями табл. 4.3.

Таблица 4.3

Определение класса опасности химических веществ,

обладающих кожным сенсибилизирующим действием

на основании данных для человека в зависимости

от степени проявления эффекта

4.8.1.4. В настоящее время многократные патч-тесты на людях с целью выявления и определения класса опасности химических веществ по сенсибилизирующему действию не проводятся. Сведения о результатах многократных патч-тестов на людях, выполненные ранее, найденные в открытых источниках информации учитываются для определения класса опасности при условии подробного описания исследования (например, количество добровольцев, условия проведения эксперимента, концентрации).

4.8.1.5. При отсутствии информации о пороговых концентрациях специфического сенсибилизирующего действия, полученных на людях, отнесение химических веществ к подклассам 1A и 1B может быть затруднено ввиду субъективности критериев для оценки данных диагностических кожных проб и других эпидемиологических свидетельств ("относительная высокая (низкая) и значительная распространенность реакций", "относительно высокая (низкая) экспозиция" см. табл. 4.3). При невозможности принятия решения о подклассе химического вещества целесообразно рассмотреть результаты иных (in silico, in chemico, in vitro, in vivo) исследований, а также данные об аналогах.

4.8.1.6. При отсутствии надежных и убедительных данных, полученных на людях, учитываются исследования на животных.

4.8.2. Определение класса опасности кожных сенсибилизаторов на основании данных, полученных на животных.

4.8.2.1. Для целей определения класса опасности приоритетным методом исследования на животных признан метод LLNA. Критерием оценки в методе LLNA является значение индекса стимуляции (далее - ИС), которое получают путем сравнения (определения отношения) пролиферации лимфоцитов в подопытной группе к пролиферации в контрольной группе. Значение ИС позволяет отнести вещество к кожным сенсибилизаторам 1 класса опасности в соответствии с критериями табл. 4.4.

Таблица 4.4

Определение класса опасности химических веществ,

обладающих кожным сенсибилизирующим действием,

на основании исследований in vivo

4.8.2.1.1. Отнесение химического вещества к кожным сенсибилизаторам подклассов 1A или 1B с использованием результатов, полученных в стандартном методе LLNA, основано на установлении величины эффективной концентрации, вызывающей трехкратное увеличение пролиферации лимфоцитов (далее - EC3). При значении EC3 <= 2% химическое вещество классифицируют как кожный сенсибилизатор подкласса 1A, при значении EC3 > 2% - как кожный сенсибилизатор подкласса 1B (табл. 4.5).

Таблица 4.5

Определение класса опасности химических веществ,

обладающих кожным сенсибилизирующим действием,

на основании исследований in vivo в зависимости

от степени выраженности эффекта

4.8.2.1.2. Установлено, что значение EC3, полученное в методе LLNA, хорошо коррелирует с пороговыми концентрациями специфического сенсибилизирующего действия, полученными в многократных патч-тестах на людях HRIPT.

4.8.2.1.3. Метод LLNA позволяет получить информацию о зависимости доза-эффект, что делает его более информативным по сравнению с тестами на морских свинках.

4.8.2.1.4. Данные, полученные в методе LLNA, проведенном строго в соответствии с протоколом, позволяют однозначно сделать вывод о способности химического вещества вызывать сенсибилизирующее действие и классифицировать его без проведения дополнительных испытаний.

4.8.2.1.5. Методы LLNA: DA, LLNA: BrdU-ELISA и LLNA: BrdU-FCM без использования радиоактивной маркировки клеток позволяют сделать вывод о сенсибилизирующем потенциале химического вещества и классифицировать его как кожный сенсибилизатор класса 1 без деления на подклассы.

4.8.2.1.5.1. Химические вещества, для которых значение ИС >= 1,8 при одной или нескольких тестируемых концентрациях в методе LLNA: DA, считаются положительными для сенсибилизации кожи.

4.8.2.1.5.2. Химические вещества, для которых значение ИС >= 1,6 при одной или нескольких тестируемых концентрациях в методе LLNA: BrdU-ELISA, считаются положительными для сенсибилизации кожи.

4.8.2.1.5.3. Химические вещества, для которых значение ИС >= 2,7 при одной или нескольких тестируемых концентрациях в методе LLNA: BrdU-FCM, считаются положительными для сенсибилизации кожи.

4.8.2.1.6. Сокращенный метод LLNA (rLLNA), в котором тестируется только одна концентрация химического вещества на меньшем количестве животных, не применяется для целей определения класса опасности, но может быть использован для подтверждения отрицательного результата (отсутствие сенсибилизирующего действия), полученного с помощью иных методов тестирования.

4.8.2.2. При определении класса опасности химических веществ по сенсибилизирующему действию по результатам GPMT (адъювантный метод) и теста Бюхлера (неадъювантный метод) учитываются данные об индукционных концентрациях и числе животных с выявленной сенсибилизацией.

4.8.2.2.1. Отнесение химического вещества к 1 классу опасности по кожной сенсибилизации проводится при выявлении >= 30% животных с положительной реакцией в методе адьювантного типа и >= 15% животных для неадьювантного типа. Необходимость большего количества животных с выявленной сенсибилизацией в адьювантном методе объясняется тем, что введение адъюванта приводит к усилению ответной реакции организма при провокации.

4.8.2.2.2. Отнесение химического вещества к подклассам 1A и 1B по кожной сенсибилизации проводится на основании данных о внутрикожной индукционной дозе в адьювантном методе в соответствии с критериями, представленными в табл. 4.5.

4.8.2.2.3. Отнесение химического вещества к подклассам 1A и 1B по кожной сенсибилизации проводится на основании данных о накожной индукционной дозе в неадьювантном методе в соответствии с критериями, представленными в табл. 4.5.

4.8.2.3. В практике отечественной токсикологии методы in vivo применяются в соответствии с методическими документами <15>. Для определения класса опасности химических веществ могут использоваться внутрикожная и комбинированная сенсибилизация морских свинок, а также многократные эпикутанные аппликации (табл. 4.6).

--------------------------------

<15> МУ 1.1.578-96.

Определение ГЗТ на мышах (метод in vivo) не подходит для определения класса опасности, но может быть использован в качестве вспомогательного для подтверждения сенсибилизирующих свойств химического вещества.

Таблица 4.6

Соотнесение класса аллергенной активности

в соответствии с методическими документами с классом

опасности по СГС химических веществ, обладающих кожным

сенсибилизирующим действием

--------------------------------

<16> МУ 1.1.578-96.

<17> GHS:unece.org/sites/default/files/2025-09/GHS%20Revl1e.pdf (в свободном доступе).

4.8.2.3.1. Соотнесение классов опасности в соответствии с национальными и международными подходами (определение класса опасности веществ по силе аллергенной активности и классификация по СГС, см. табл. 4.6) проведено с учетом близости:

- протоколов проведения испытаний на морских свинках в соответствии с национальными методическими документами (см. п.п. 4.8.2.3), а также протоколами GPMT и теста Бюхлера;

- способов индукции;

- индукционных концентраций;

- количества животных с положительными реакциями (частота развития сенсибилизации);

- оценок кожных реакций в провокационном тесте (табл. 4.7).

Таблица 4.7

Корреляция оценки степени кожных реакций в соответствии

с методом ОЭСР N 406 и в провокационном тесте в соответствии

с методическими документами

--------------------------------

<18> МУ 1.1.578-96.

4.8.2.4. Методы in silico, in chemico, in vitro могут быть использованы в качестве источников дополнительной информации при определении класса опасности химических веществ по сенсибилизирующему действию.

Массив данных, полученных в тестах in chemico и (или) in vitro, по оценке сенсибилизирующей активности химических веществ является ограниченным, поэтому использование данных методов в качестве самостоятельных при определении класса опасности не рекомендуется.

4.8.2.5. Определение класса опасности химического вещества с использованием аналогового подхода может быть применена при наличии убедительных доказательств сенсибилизирующего действия химических веществ, близких по структуре, физико-химическим свойствам и биологическому действию.

4.9. Определение класса опасности респираторных сенсибилизаторов.

4.9.1. Определение класса опасности респираторных сенсибилизаторов в большинстве случаев основано на данных, полученных на людях.

4.9.2. Для отнесения химического вещества к респираторному сенсибилизатору 1 класса опасности необходимо наличие клинической картины аллергической реакции (например, аллергический ринит, аллергическая бронхиальная астма, аллергический альвеолит), причем подтверждение иммунологического механизма обязательным не является. Также учитывается численность подвергшегося воздействию населения и степень воздействия.

4.9.3. Клиническая картина и данные испытаний легочной функции могут подтверждаться иммунологическими исследованиями in vivo (например, инъекционная кожная проба) или in vitro (например, серологический анализ).

4.9.4. Подтверждением респираторного сенсибилизирующего действия могут быть положительные результаты бронхиальной пробы с испытуемым веществом для определения специфической повышенной чувствительности.

4.9.5. Признанные и утвержденные модели испытаний животных на респираторную сенсибилизацию, валидированные для целей определения класса опасности химических веществ по СГС, отсутствуют.

4.9.6. Исследования на животных при повторном ингаляционном воздействии, в рамках которых проводят определение в крови IgE или других специфических иммунологических показателей (изменение уровней базофилов, тучных клеток, интерлейкинов, структурные изменения нейтрофилов <19>), а также специфическая (аллергическая) легочная реакция на морских свинках могут указывать на способность вещества вызывать респираторную сенсибилизацию у человека.

--------------------------------

<19> МУ 1.1.578-96.

4.9.7. Определение класса опасности химического вещества с использованием аналогового подхода проводится при наличии убедительных доказательств респираторного сенсибилизирующего действия химических веществ, близких по структуре, физико-химическим свойствам и биологическому действию.