2.3.2. Специфическая лабораторная диагностика

- Рекомендовано с целью подтверждения заболевания определение антител класса M (IgM) к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в крови, определение антител класса G (IgG) к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в крови методом ИФА, РНИФ не ранее чем через 10 - 14 дней от начала заболевания [4, 5].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 5).

Комментарии: поскольку для боррелиозной инфекции характерен медленный антителогенез, на ранних стадиях развития инфекционного процесса результаты серологических тестом могут быть ложноотрицательными, поэтому при наличии отрицательного результата необходимо исследование сыворотки крови на предмет выявления специфических антител в динамике заболевания, а именно через 3 недели, 6 недель, 3 месяца, 6 месяцев.

- Рекомендовано для верификации диагноза определение антител класса M (IgM) к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в спинномозговой жидкости, определение антител класса G (IgG) к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в спинномозговой жидкости методом ИФА, РНИФ в случаях развития нейроборрелиоза при поражении ЦНС в случаях, когда показана спинномозговая пункция, и определение специфических антител в крови показало отрицательный (возможно, ложноотрицательный) результат [4, 5, 34, 37].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 5).

- Рекомендуется пациентам с подозрением на болезнь Лайма в случаях сомнительных результатов серологического исследования сыворотки крови, при хроническом течении боррелиозной инфекции для установления срока давности инфекционного процесса и дифференциальной определение антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в крови методом иммуноблоттинга [46 - 49].

Уровень убедительности рекомендаций B (уровень достоверности доказательств - 3).

Комментарии: для дифференциальной диагностики хронического боррелиоза с синдромосходными заболеваниями всем больным следует проводить иммуноблоттинг (определение антител к возбудителям иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в крови), который позволяет обнаружить специфические антитела к определенным белкам боррелий, кодируемым генами хромосом: p83 - 100, p73, p66, p58, p41, p39 (BmpA), а также генами плазмид: OspA, OspC (p20 - 25), OspB, p17, p31, BBK32, VlsE. При определении антител IgM методом иммуноблоттинга результат является положительным при выявлении АТ к белку OspC и как минимум к двум антигенам из группы: VlsE, p41, p39, p17. При определении антител IgG методом иммуноблоттинга результат является положительным при выявлении антител к VlsE (высокорекомбинантному очищенному антигену) и 4 антигенам из группы: p83 - 100, p19, p21, p23, p28, p30, p39, p41, p45, p58, p66.

- Рекомендуется всем пациентам с подозрением на болезнь Лайма для идентификации возбудителя и дифференциальной диагностики с другими клещевыми инфекциями определение ДНК возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в крови методом ПЦР на 7 - 14 день от момента присасывания клеща, молекулярно-биологическое исследование спинномозговой жидкости на возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato при наличии показаний к спинномозговой пункции в случаях подозрения на нейроборрелиоз, определение ДНК возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в биоптатах кожи методом ПЦР для подтверждения боррелиозной этиологии ХААД [3, 23, 25, 30, 32, 34, 35, 36, 42, 43].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 5).

Комментарий: метод ПЦР высокочувствителен, и теоретически позволяет установить присутствие нескольких единичных молекул ДНК в биологическом материале. Однако, на сегодняшний день полностью известна генетическая структура штамма B31 (B.b.s.s.), который является референс-штаммом всей группы возбудителей ИКБ. Генетическая структура одних и тех же локусов различных геновидов боррелий отличается гетерогенностью, что зачастую обусловливает ложноотрицательный результат. Наибольшую диагностическую ценность представляет метод ПЦР для обнаружения боррелий в крови спустя 7 - 14 дней от момента присасывания инфицированного боррелиями клеща ввиду спирохетемии, а также ПЦР ликвора при подозрении на нейроборрелиоз с поражением ЦНС.

Считаем, что определение ДНК возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в биоптатах кожи методом ПЦР для верификации эритемной формы заболевания не оправдано в клинической практике, т.к. этот диагноз эритемной формы не вызывает затруднений. Однако, с целью дифференциальной диагностики для подтверждения боррелиозной этиологии ХААД при хроническом течении заболевания эффективность молекулярно-генетического исследования биоптата кожи составляет 60 - 61% [49, 50]. Кроме того, определение ДНК возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi sensu lato в синовиальной жидкости методом ПЦР также не оправдано, поскольку известно, что возбудитель локализуется в пограничных слоях синовии [44, 45].