Приложение А3.5

ПРАВИЛА
ЗАБОРА МАТЕРИАЛА ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
НА ОПИСТОРХОЗ <1> [7, 11, 14, 65]

--------------------------------

<1> Методические указания. МУК 4.2.3145-13 "Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 26 ноября 2013 г.).

Гельминтоовоскопические методы:

а) Исследование дуоденального содержимого. Определенные трудности в выявлении яиц описторхов определяются их очень мелкими размерами, а также возможной низкой интенсивностью инвазии. Поэтому наиболее вероятно обнаружение яиц описторхов в желчи, полученной при дуоденальном зондировании. С этой целью проводится исследование всех порций дуоденального содержимого (A, B и C). Исследуемую жидкость смешивают с равным количеством эфира, тщательно взбалтывают и центрифугируют. Осадок микроскопируют.

б) Исследование фекалий. Метод нативного мазка - самый простой метод исследования, однако его эффективность крайне мала при низкой интенсивности инвазии, а при средней и высокой интенсивности инвазии составляет 44 - 63%. Более информативен метод Като - метод толстого мазка под целлофаном. Толстый мазок представляет собой слой неразбавленных фекалий на предметном стекле, спрессованный под Целлофановые покровные пластинки листком тонкого гигроскопичного целлофана, предварительно пропитанного глицерином. При воздействии сухого теплого воздуха слой фекалий в результате потери влаги и абсорбции глицерина просветляется, яйца описторхов приобретают четкую видимость и определяются при малом увеличении.

В последние годы наблюдается повсеместное снижение интенсивности инвазии, причина которого остается неясной. Либо это действительно снижение интенсивности инвазии, либо, напротив, как это ни парадоксально, высокая интенсивность инвазии. Уже давно установлено, что при высокой интенсивности инвазии описторхов их среда обитания насыщается продуктами обмена, которые тормозят рост паразитов. Происходит задержка и в развитии половых органов паразитов вплоть до их атрофии, следствием чего может быть и незначительное выделение яиц [7].

В условиях низкой интенсивности инвазии предпочтительнее использование методов обогащения. В основу их положена разность удельного веса яиц гельминтов и применяемых растворов. Удельный вес яиц описторхов больше удельного веса раствора, поэтому они концентрируются в осадке, который и исследуют под микроскопом (методы осаждения, или седиментации). Принцип эфир-уксусного метода осаждения яиц гельминтов из кала заключается в обработке кала последовательно 10% раствором уксусной кислоты и эфиром. Уксусная кислота эмульгирует кал, проникая в непереваренные частицы, состоящие преимущественно из клетчатки. Последующее добавление в пробирку эфира и перемешивание приводит к извлечению из содержимого пробирки растворимой в эфире уксусной кислоты вместе с пропитанными ею каловыми частицами. Проба кала, обработанная этими веществами, всплывает, а яйца описторхов, обладающие большим, чем вода, удельным весом, оседают. При использовании этого метода удается диагностировать инвазию у 66% больных описторхозом даже при малой интенсивности инвазии. Принцип химико-седиментационного метода заключается в центрифугировании пробирки, в которой на раствор азотистокислого натрия наслоена проба кала, эмульгированная 1% раствором уксусной кислоты. Химическая реакция между азотистокислым натрием и уксусной кислотой приводит к выделению пузырьков газа, пронизывающих слой гомогенизированного кала, препятствуя его осаждению. Яйца описторхов целиком выпадают в осадок с небольшим количеством клетчатки.

Для повышения эффективности исследования фекалий рекомендуется проводить исследование 3-кратно, а также использовать в течение 5 - 6 дней перед обследованием подготовительную диету с исключением продуктов, содержащих растительную клетчатку (овощи, фрукты, хлебобулочные и макаронные изделия, каши). Пациенту не рекомендуется употреблять в пищу грибы, печень, большое количество грубой клетчатки, принимать сорбенты. После масляных клизм и приема бария должно пройти несколько суток. В случае лечения антибиотиками широкого спектра действия или антибактериальными препаратами кал для исследования следует начать собирать спустя 7 - 10 дней после окончания приема препаратов.

Кал после дефекации отбирают из разных участков в количестве не менее 50 г. При невозможности исследования пробы кала сразу после дефекации или в день поступления материала в лабораторию, пробу кала хранят при температуре от 0 до 4 °C, с консервантом в темном прохладном месте до 2 - 3 недель. <1>

Диагностика острого описторхоза с помощью гельминтоовоскопических методов может быть затруднена, поскольку продукция яиц у паразитов начинается не ранее 3 недели с момента инвазии, а также у больных при однократном заражении в очагах с низкой интенсивностью инвазии.