Безопасная техника приготовления препаратов "висячей" и "раздавленной" капли

4.22. Для приготовления препарата "висячая" капля используются обезжиренные покровные стекла и предметные стекла с круглым отшлифованным углублением - лункой. Покровное стекло, пинцетом, размещается на плоской поверхности (перевернутая кювета, крышка от чашки Петри и др. помещенные в поддон). На середину покровного стекла бактериологической петлей наносится капля исследуемой бульонной культуры микроорганизмов или взвесь микроорганизмов, приготовленная в 0,9% растворе натрия хлорида.

На края лунки предметного стекла при помощи палочки наносится вазелин для обеспечения герметичности камеры. Предметное стекло переворачивается рукой лункой вниз и опускается на покровное стекло с каплей таким образом, чтобы его края не выступали за края предметного, а капля культуры оказалась в центре углубления и не касалась краев и дна лунки. Предметное стекло осторожно прижимается к вазелиновому кольцу пинцетом.

Сконструированная таким образом герметично закрытая камера пинцетом переворачивается покровным стеклом вверх, помещается на предметный столик микроскопа и фиксируется клеммами.

Перед помещением камеры с "висячей" каплей на предметный столик микроскопа необходимо удостоверится в том, что на его поверхности отсутствуют какие-либо капли. Это позволит заметить появившиеся капли в случае раздавливания стекла объективом, что будет расцениваться как авария с разбрызгиванием.

Для просмотра мазка под микроскопом на покровное стекло наносится капля иммерсионного масла и устанавливается фазово-контрастный объектив. Под контролем зрения (наблюдая сбоку), объектив опускается до легкого соприкосновения с маслом. Медленно опуская объектив (или поднимая столик), устанавливается фокус изображения.

После просмотра мазка объектив микроскопа осторожно поднимается, под контролем зрения так, чтобы покровное стекло не приклеилось к объективу и не оторвалось от предметного стекла. Камера снимается со столика микроскопа и кладется на подставку. Концом анатомического пинцета покровное стекло слегка выдвигается за край стекла с лункой и осторожно пинцетом отделяется от него.

Покровное стекло и стекло с лункой пинцетом помещаются в емкость с дезинфицирующим раствором, промаркированную наименованием "Для обеззараживания мазков" или в контейнер для отходов (с последующим обеззараживанием автоклавированием). Бранши пинцета погружаются в емкость с 95% этиловым спиртом и обжигаются в пламени спиртовки (горелки).

Для приготовления "раздавленной" капли на середину предметного стекла бактериологической петлей наносится небольшая капля исследуемой бульонной культуры микроорганизмов или взвесь микроорганизмов, приготовленная в 0,9% растворе натрия хлорида. Покровное стекло пинцетом ставится на ребро у края капли с таким расчетом, чтобы оно располагалось по отношению к предметному стеклу "ромбом", и медленно опускается для исключения образования в капле пузырьков воздуха. Препарат просматривается под микроскопом, как описано выше.

Мазки дрожжевых культур готовятся аналогично мазкам бактериальных культур. Мицелиальная культура, взятая с агара, переносится на сухое предметное стекло и на нее наносится 1 - 2 капли фиксирующего раствора. Мазок накрывается покровным стеклом. Пинцетом аккуратно стекло надавливается до тех пор, пока оно не достигнет фиксирующего раствора по краю образца, но так, чтобы жидкость не переливалась за края и не попадала на верхнюю сторону покровного стекла. Готовый образец просматривается под микроскопом. Все манипуляции, в том числе и просмотр под микроскопом, проводятся в чашке Петри.

После просмотра препаратов, в целях обеззараживания, камеры разбираются над емкостью, содержащей дезинфицирующий раствор, промаркированной наименованием "Для обеззараживания мазков". Анатомическим пинцетом захватывается край покровного стекла и осторожно отделяется от предметного. Покровное и предметное стекла погружаются в дезинфицирующий раствор. Бранши пинцета обжигаются.

По окончании работ текущую дезинфекцию микроскопа проводят в соответствии с п. 4.21.