7.2. Биохимическое тестирование

7.2.1. О ферментации лактозы (и сахарозы) в среде Олькеницкого и ферментации лактозы в среде Клиглера и Ресселя судят по появлению желтой окраски в скошенной части агара, а о ферментации глюкозы - по такому же окрашиванию в столбике. Газообразование устанавливают по наличию пузырьков газа и разрыву агара, а образование сероводорода - по почернению среды. В среде Олькеницкого при росте культуры, гидролизирующей мочевину, среда приобретет диффузный яркий красно-малиновый цвет.

7.2.2. У подозрительных культур изучают ферментативные характеристики, позволяющие определить родовую принадлежность выделенных бактерий. Для этих целей используют тесты, позволяющие определить способность к образованию индола, наличие роста на средах с цитратами, наличие лизин-декарбоксилазы, фенилаланиндезаминазы, способность к разложению мочевины и образованию ацетил-метил-карбинола в реакции Фогес-Проскауэра. Ставят также пробу с метиловым красным и определяют подвижность.

7.2.3. Сальмонеллы индола не образуют, способны расти на средах с цитратами, декарбоксилировать лизин (за исключением некоторых штаммов S. Typhimurium, S. Enteritidis), не имеют фенилаланиндезаминазы, не разлагают мочевину, отрицательны в реакции Фогес-Проскауэра, положительны в пробе с метил-рот, подвижны (за исключением S. Gallinarum).

7.2.4. Если культура не ферментирует лактозу, не расщепляет мочевину, но ферментирует глюкозу с газообразованием и образует сероводород, то она подозрительна на принадлежность к роду Salmonella и подвергается дальнейшему изучению.

7.2.5. Для определения таксономической принадлежности культур рекомендуется использовать современные системы для идентификации микроорганизмов, зарегистрированные и разрешенные к применению в Российской Федерации в установленном порядке <21>:

--------------------------------

<21> Часть 4 статьи 38 Федерального закона от 21.11.2011 N 323-ФЗ; постановление Правительства Российской Федерации от 27.12.2012 N 1416.

- пластины биохимические, дифференцирующие энтеробактерий (например, набор для идентификации Enterobacteriaceae Api20E <22>);

--------------------------------

<22> Примечание: допускается использовать биохимические, дифференцирующие энтеробактерин пластины с аналогичными или лучшими характеристиками.

- автоматические микробиологические анализаторы для качественного и количественного определения микроорганизмов (например, БАК ТРАК, VITEK <23>);

--------------------------------

<23> Примечание: допускается использовать автоматические микробиологические анализаторы для качественного и количественного определения микроорганизмов с аналогичными или лучшими характеристиками.

- прямое белковое профилирование культуры бактерии с использованием программно-аппаратного комплекса с системой времяпролетной масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией (англ. Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Mass Spectrometry, далее - MALDI-ToF MS) (например, MALDI Biotyper <24>). Идентификация на основе прямого белкового профилирования обладает высокой диагностической и экономической эффективностью, быстротой получения результатов и простотой выполнения исследования и позволяет провести идентификацию штамма только до рода Salmonella.

--------------------------------

<24> Примечание: допускается использовать программно-аппаратные комплексты MALDI-ToF MS с аналогичными или лучшими характеристиками.