3.2.7. Обработка результатов испытания на пролонгированное (удлиненное) действие лекарственных препаратов инсулина и его аналогов с использованием критерия Стьюдента

Пролонгированное действие препаратов инсулина и его аналогов определяют путем сравнения их гипогликемического действия с действием раствора стандартного образца инсулина человека после подкожной инъекции. В качестве тест-объекта используют кроликов, а в качестве ответа - концентрацию глюкозы в крови животных через 1,0; 1,5; 3,5 и 6,0 ч после введения (в % от исходного уровня). В таблице 3.2.7.-23 приведены концентрации глюкозы в крови двух групп кроликов по 9 особей в каждой до и после введения одинаковой дозы стандартного образца и испытуемого образца инсулина (взятие крови из краевой вены уха).

Таблица 3.2.7.-23. - Ответы (концентрация глюкозы в крови кроликов в мг%) до и после введения стандартного образца и испытуемого образца инсулина

Для каждого кролика в каждой временной точке рассчитывают индивидуальную относительную концентрацию глюкозы в крови в процентах от исходного уровня данного животного.

Так как в течение 6 ч средняя относительная концентрация глюкозы в крови кроликов, получивших раствор стандартного образца, достигла 103,7%, то в качестве контрольной точки принимают время, когда она достигла 100% (между 4,5 и 6 ч).

1. Расчет контрольной временной точки:

1.1. У группы кроликов, получивших стандартного образца, вычисляют изменение средней относительной концентрации глюкозы в крови на завершающем этапе опыта. Для этого вычисляют разность между средними значениями относительной концентрации глюкозы в крови группы животных, получивших раствор стандартного образца, через 6,0 и 4,5 ч после введения:

103,67 - 69,82 = 33,85 (%).

1.2. Разность между средним исходным уровнем и средней концентрацией глюкозы через 4,5 ч после введения:

100,00 - 69,82 = 30,18 (%).

1.3. Составляют следующую пропорцию:

прошло от 4,5 ч до контрольной точки.

1.4. Контрольная временная точка равна: 4,50 + 1,34 = 5,84 (ч).

2. Для каждого животного рассчитывают относительную концентрацию глюкозы в крови в контрольной временной точке. Например, для кролика N 1 в первой группе:

2.1. 96,64 - 55,46 = 41,18 (%) за 1,5 ч с 4,5 до 6 ч.

Следовательно, за время, прошедшее от 4,50 ч до контрольной временной точки 5,84 ч, концентрация глюкозы в крови данного животного возросла на

.

2.2. Поэтому, концентрация глюкозы в крови кролика N 1 в контрольной временной точке составила 55,46 + 36,79 = 92,25 (%).

Такие же расчеты проводят и для остальных животных. Полученные результаты переносят в таблицу 3.2.7.-25.

Для того чтобы проверить равенство дисперсий в двух группах, делят дисперсию на меньшую: , что меньше критического значения критерия Фишера для f₁ = f₂ = 8p = 0,05, равного 3,44 (таблица 3 Приложения). Это значит, что различие двух дисперсий статистически недостоверно. Поэтому проводят сравнение двух средних значений относительной концентрации глюкозы в крови 2 групп животных с помощью критерия Стьюдента по формуле:

,

где f = n₁ - 1;

t_{критич.} = 1,958788 + 2,429953 / f + 2,189891 / f² +

+ 4,630189 / f³ + 1,398179 / f⁹ ~= 2,120,

при f = n₁ + n₂ - 2 = 16 и p = 0,05.

Это говорит о том, что в контрольное время (5,84 ч) средняя относительная концентрация глюкозы в крови кроликов, получивших испытуемый образец, была достоверно ниже, чем таковая в крови животных, получивших раствор стандартного образца, что свидетельствует о наличии пролонгированного действия испытуемого образца.

Таблица 3.2.7.-24. - Концентрация глюкозы в крови кроликов в % от исходного уровня

Таблица 3.2.7.-25. - Результаты определения пролонгированного действия (%)

Результаты опыта в графическом виде приведены на рисунке 3.2.7.-5.

Рисунок 3.2.7.-5. - Гипогликемические кривые кроликов в % от исходного уровня (определение пролонгированного действия)

Примечание. Если превышает критическое значение критерия Фишера, то для вычисления наблюдаемого значения критерия Стьюдента следует применять формулу:

при .

Вычисленное значение t_набл. сравнивают с t_критич., как указано выше (число степеней свободы f округляют до целого числа). Критическое значение критерия Стьюдента можно также найти в приложениях (таблица 2 Приложения). Подробнее см. раздел 1.3.1 "Сравнение средних значений двух независимых выборок".

Если распределение ответов в группах не является нормальным, то для сравнения двух независимых выборок следует воспользоваться непараметрическим критерием Манна - Уитни. Предварительную проверку на нормальность проводят, как описано в разделе 2.3.1.