4.1.1. Исходные материалы

12. Генетически модифицированные клетки получают посредством ex vivo переноса генов или ex vivo редактирования генома. В отношении обеих процедур используются разные типы исходных материалов. Они включают человеческие или животные клетки и инструменты (например, векторы, мРНК), используемые для их генетической модификации. Последние могут различаться и будут зависеть от используемой процедуры генетической манипуляции.

13. Для переноса генов ex vivo инструментами, используемыми для генетической модификации клеток, должны быть подготовлены, соответственно, вектор (например, вирусный или невирусный) и компоненты для их получения. Положения Правил производственной практики должны применяться, начиная с системы банков клеток, используемых для производства вектора, и далее на всех этапах производства.

14. При редактировании генома для генетической модификации клеток могут, если это обосновано заявителем в модуле 3 регистрационного досье, использоваться такие инструменты, как:

векторы (например, вирусные или невирусные), несущие последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующие модифицирующий фермент;

мРНК, экспрессирующие модифицирующий фермент;

сам модифицирующий фермент;

генетическая последовательность для модификации клеточного генома (например, направляющая гидовая РНК(gRNA)) или рибонуклеопротеин (например, белок Cas9 в заранее образованном комплексе с гидовой РНК);

матрица для репарации (например, фрагмент линейной ДНК или плазмиды) и компоненты для их получения.

15. Если используются векторы, мРНК или белки, положения Правил производственной практики должны применяться, начиная с требований к системе банков, используемых для получения (производства) указанных материалов, и далее на всех этапах производства.

16. В отношении лекарственных препаратов на основе индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, создаваемых при помощи генетической модификации, положения Правил производственной практики и настоящей главы должны применяться после заготовки клеток, включая создание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток и последующий процесс отбора. На ранних стадиях создания индуцированных плюрипотентных стволовых клеток клеточный материал может быть ограничен и доступность образцов влияет на масштаб испытаний и квалификацию процесса. В таких случаях необходимо соблюдать требования Правил производственной практики в отношении высокотехнологичных лекарственных препаратов.

В случае производства активных веществ, состоящих из генетически модифицированных клеток, получаемых от генетически модифицированных животных, положения Правил производственной практики должны применяться после заготовки клеток и испытаний в соответствии с требованиями, предъявляемыми к ксеногенным клеткам. Если используются клетки или ткани человеческого происхождения, необходимо соблюдать требования к качеству, доклиническим и клиническим аспектам разработки бесклеточных генотерапевтических лекарственных препаратов, утверждаемые Комиссией.

17. Для комбинированного высокотехнологичного лекарственного препарата, содержащего генетически модифицированные клетки и дополнительные вещества (например, каркасы, матриксы, скаффолды, медицинские изделия, биоматериалы, биомолекулы и (или) другие компоненты), которые комбинируются с клетками, подвергшимися манипуляции, неотъемлемую часть которых они образуют, такие дополнительные вещества должны считаться исходными материалами, даже если не имеют биологического происхождения. Эти дополнительные вещества должны квалифицироваться в отношении их целевого назначения в соответствии с положениями главы 31 настоящих Правил.

18. Исходные материалы и исходное сырье, используемые для производства генетически модифицированных клеток и продуктов с отредактированным геномом, должны подвергаться тщательной квалификации, чтобы гарантировать стабильный процесс производства. Объем данных, предоставляемых в отношении каждого исходного материала, аналогичен объему данных, который требуется соответственно в отношении активной фармацевтической субстанции соматотерапевтического лекарственного препарата и активного вещества генотерапевтического лекарственного препарата. При использовании заранее сформированного комплекса рибонуклеопротеина, который может использоваться во время отдельных процедур редактирования генома, данные в отношении каждого исходного материала (например, рекомбинантного белка и гидовой РНК) представляются в точно таком же объеме, какой требуется для активной фармацевтической субстанции биологического лекарственного препарата и химического лекарственного препарата в соответствии с приложением N 1 к Правилам регистрации. Необходимо представить подробные сведения о производственном процессе, контроле материалов и сырья, установлению характеристик производственного процесса, разработке производственного процесса, контроле критичных стадий производственного процесса, валидации производственного процесса, аналитических методиках и стабильности. Сведения об исходных материалах необходимо включить в раздел "Контроль исходных материалов" регистрационного досье как при их самостоятельном производстве, так и при поставке другим производителем. Вместе с тем в отношении вектора и клеток могут быть предусмотрены отдельные модули в подразделе 3.2.S регистрационного досье лекарственного препарата.

19. Независимо от использования процедур ex vivo переноса генов или технологий редактирования генома, выбор вида доставляющего вектора или носителя, используемого для генетической модификации ex vivo, необходимо обосновать исходя из характеристик клеток-мишеней, ожидаемой модификации генома, клинического показания и др. Молекулярный дизайн вектора должен быть обоснован критериями безопасности и эффективности. При использовании интегрирующихся векторов следует выбрать соответствующий дизайн, чтобы снизить риски возникновения инсерционного мутагенеза и повысить безопасность вектора (например, самоинактивирующиеся векторы (SIN)). Аналогично, если нуклеазы, редактирующие геном, такие как CRISPR/Cas9, экспрессируются в клетках-мишенях, требуются стратегии для увеличения целевых и уменьшения нецелевых эффектов, которые должны быть обоснованы. Такие стратегии включают в себя транзиентную (временную) экспрессию нуклеазы и соответствующую конструкцию кодируемых ДНК-связывающих доменов модифицирующего фермента и малой гидовой РНК для повышения селективности модифицирующего фермента.

20. При производстве лентивирусных, ретровирусных, аденоассоциированных или других вирусных векторов, которые будут использоваться для генетической модификации клеток, с использованием транзиентной трансфекции клеточных линий-продуцентов, последовательность плазмид, используемых для обеспечения векторной функции (функций), должна быть верифицирована перед их использованием в производстве. В случае производства рекомбинантной мРНК или белков используемые для производства кодирующие последовательности плазмид должны быть проверены перед их применением в процессе производства с помощью транзиентной трансфекции.

21. Необходимо избегать использования несвязанных ДНК-последовательностей (таких как маркеры селекции), которые могут попасть в препарат генетически модифицированных клеток, если не обосновано иное.

22. Перед использованием вектор должен быть стерильным. Необходимо подтвердить отсутствие в нем любой нежелательной вирусной контаминации, включая вирусы-помощники или гибридные вирусы, такие как в системах производства аденоассоциированных вирусных векторов, контаминации посторонними агентами или репликативно-компетентными векторами для репликативно-дефектных векторов. В последнем случае необходимо использовать валидированный чувствительный анализ (или комбинацию анализов), такой как количественный ПЦР-анализ, дополненный анализом инфекционности на чувствительных клетках. Необходимо избегать использования неочищенных векторов в процессе трансдукции.

23. Если применимо, необходимо создать должным образом контролируемую систему хранения исходных материалов, позволяющую хранить, извлекать и поставлять их без какого-либо нарушения целевых характеристик.

24. Исходный материал необходимо хранить в контролируемых и оптимальных условиях, чтобы обеспечить поддержание критичных характеристик для целевого назначения, в частности приемлемого уровня постоянства качества продукта, которого необходимо придерживаться в пределах параметров серий, испытанных клинически.