10.1. Фармакодинамика и фармакокинетика

105. Независимо от вида генетической модификации (редактирование генома, введение регуляторных последовательностей, введение трансгена), ее ожидаемый эффект необходимо подтвердить на клеточном уровне. Исследования включают в себя оценку специально внедренных изменений в геном клеток, оценку экспрессии эндогенного гена после внедрения экзогенных регуляторных последовательностей или оценку экспрессии трансгена и оценку активности продуктов экспрессии трансгенов (если выполнимо).

106. В некоторых случаях итоговое поведение и функцию модифицированных клеток необходимо изучить in vitro и (если это целесообразно и выполнимо) сравнить с немодифицированными клетками. В случае если ожидается, что немодифицированные клетки также будут иметь терапевтический эффект, необходимо напрямую сравнить фармакологический эффект генетически модифицированных клеток с эффектом немодифицированных клеток, чтобы отличить эффекты, обусловленные продуктом, от эффектов, обусловленных продуктом, экспрессируемым не генетически модифицированными клетками.

107. Необходимо представить результаты исследований проверки (доказательства) концепции, которые обосновывают потенциальный клинический эффект и (или) доказывают ожидаемый принцип действия генетически модифицированных клеток. Вместе с тем демонстрация in vivo концепции на животных моделях может оказаться невыполнимой. Например, если специфический антиген-мишень экспрессируется при заболеваниях с разной патофизиологией (как антиген CD19 при гемобластозах и солидных опухолях), необходимо подтвердить научную гипотезу при помощи исследований механизма действия in vitro, специфичного для мишени.

108. Продолжительность экспрессии трансгена необходимо оценивать in vivo, если не обосновано иное. В случае непредвиденного отсутствия или, наоборот, повышения экспрессии трансгена необходимо провести дополнительные исследования, чтобы определить причины изменения экспрессии. В отношении лекарственных препаратов, предназначенных для обеспечения долгосрочной пользы, используются суррогатные in vivo-модели, чтобы получить доказательство стабильности экспрессии трансгена в течение значимого для долгосрочной пользы периода времени. В отношении клеток, которые были инкапсулированы и разработаны для секреции продукта гена, необходимо представить данные, подтверждающие выживаемость генетически модифицированных клеток in vivo и соответствующую секретирующую активность.

109. В отношении любых дополнительных структур, которые были введены в трансген или в модифицированные клетки, направленных, например, на регулирование экспрессии трансгена или осуществление преднамеренной элиминации генетически модифицированных клеток, заявителю необходимо провести оценку надлежащего функционирования этих структур и отразить ее в регистрационном досье.

110. Фармакокинетические исследования необходимо планировать таким образом, чтобы изучить дальнейшее существование in vivo генетически модифицированных клеток (биораспределение, направленная миграция клеток, приживление, стабильность и персистенция). Необходимо детально изучить возможность трансляции данных, получаемых на моделях in vivo. Например, на ксенотрансплантатных опухолевых моделях, которые не соответствуют локализации опухолей у человека, биораспределение может не отражать клиническую ситуацию.

111. В отношении секретируемых продуктов генов в анализ необходимо включить местную и (или) системную экспозицию и персистенцию продукта экспрессии трансгена.

112. В случае если генетически модифицированные клетки инкапсулируются в биосовместимый материал, в целях предотвращения биораспределения клеток необходимо провести соответствующие исследования, которые либо продемонстрируют целостность биосовместимого материала in vivo и успешное удержание клеток, либо позволят оценить биораспределение и длительность персистенции in vivo мигрировавших жизнеспособных клеток.

113. Риск генеративной передачи, связанный с введением генетически модифицированных клеток человека, считается низким и сложно поддающимся оценке в рамках доклинических исследований. В связи с этим отсутствие подобных исследований необходимо обосновать, если только генетически модифицированные клетки не несут значительно более высокий риск непреднамеренной генеративной передачи (например, из-за мобилизации интегрированных векторных последовательностей или высвобождения вектора).