Среды и реактивы для выявления бактерий кишечной группы

1. Концентрированная среда Эйкмана. В 1 л воды растворяют 100 г пептона, 50 г хлористого натрия, смесь нагревают до кипения, фильтруют, прибавляют 100 г глюкозы, устанавливают pH 7,4 - 7,6, разливают по 10 куб. см в пробирки. Среду стерилизуют текучим паром 30 мин., считая с момента, когда термометр покажет температуру 100 град C. Стерилизация текучим паром должна производиться 3 дня подряд. В промежутках между стерилизациями среда должна находиться в помещениях с температурой не ниже 16 град. C.

2. Среда Эндо. 100 куб. см мясо-пептоного агара (pH 7,4) расправляют на водяной бане, охлаждают до 70 град. C и прибавляют 1 г химически чистой лактозы, предварительно растворенной в небольшом количестве стерильной прокипяченной дистиллированной воды.

В отдельных пробирках приготовляют:

а) 2 - 3 куб. см спиртного насыщенного раствора основного фуксина;

б) 10 куб. см 10%-ного водного раствора сернокислого натрия или 10 куб. см 20%-ного водного раствора кристаллического сернокислого натрия.

В стерильную пробирку отмеряют 1 куб. см раствора фуксина и прибавляют раствор сернистокислого натрия до обесцвечивания фуксина. Приготовленную смесь вливают в растопленный агар, хорошо перемешивают (избегая образования пены) и разливают по чашкам.

Горячий агар имеет бледно-розовый цвет, при застывании становится бесцветным.

3. Сухая среда Эндо выпускается Дагестанским научно-исследовательским институтом питательных сред.

4. Среда Гисса. К 100 куб. см дистиллированной воды добавляют 1 г пептона, 0,5 химически чистого хлористого натрия, 0,5 углевода и 1 куб. см индикатора Анредэ. Устанавливают pH 7,0. Среду разливают в пробирки по 5 куб. см с поплавками и стерилизуют при 110 град. C 20 мин. Среда должна быть бесцветной или соломенно-желтого цвета без розового оттенка.

Можно использовать сухие среды Гисса: сухой препарат с индикатором ВР, глюкозой.

5. Индикатор Андредэ. К 100 куб. см дистиллированной воды добавляют 0,5 г кислого фуксина и 16,4 куб. см 1%-ного раствора едкого натрия. Стерилизуют при 110 - 112 град. C в течение 5 мин. и хранят в темноте.

6. Реактивы для окраски по Граму.

а) 1%-ный водный раствор метилового фиолетового;

б) раствор йода по Бурке: 100 куб. см дистиллированной воды, 2 г йодистого калия, 1 г йода;

в) 0,5%-ный водный раствор сафранина.